Micropropagation and organogenesis of Anthurium andreanum Lind cv Rubrun.

Tissue culture techniques are routinely used for mass propagation and the establishment of disease free stock material. Virtually all pot type Anthuriums available in the market today are produced by tissue culture. In this chapter, we describe an efficient protocol to obtain Anthurium andreanum cv Rubrun vitro plants through micropropagation and organogenesis. Seeds from plant spadixes were germinated on MS medium supplemented with 0.5 mg/L BA. Micro-cuttings from in vitro germinated seedlings were subcultured on MS medium containing 2 mg/L BA and 0.5 mg/L NAA. Four-week-old in vitro plants obtained from microcuttings, showed callus proliferation at the stem base. The development of shoots and plantlets was observed from callus tissue. We also describe a detailed method for the histological analysis of callus tissue and a vitro plants acclimatization protocol.

Genetic stability of Solanum tuberosum L. CV. Désirée plantlets obtained from embryogenic cell suspension cultures

Se analizó la estabilidad genética de plántulas de Solanum tuberosum L. cv. Désirée obtenidas a partir del cultivo de células embriogénicas en suspensión, las que fueron inducidas a partir de callos mixoploides con abundantes células binucleadas. Las plantas regeneradas a partir de estos tejidos presentaron un número euploide de cromosomas (2n=4x=48). Este resultado indica que en este sistema las células euploides fueron seleccionadas para seguir el proceso de embryogenesis somática y regeneración de plantas. La estabilidad genotípica de las plantas regeneradas fue evaluada mediante marcadores RAPD. Los resultados indican que las nuevas poblaciones de plantas son altamente homogéneas.

Micropropagación y organogénesis de dioscorea alata (ñame) / Micropropagation and organogenesis of dioscorea alata (ñame)

Para establecer una metodología eficiente para la propagación in vitro del ñame (Dioscorea alata) se obtuvieron plantas a partir de tubérculos en condiciones de vivero. Para micropropagación se extrajeron segmentos de tallo de 1 cm de largo con un nudo y 1-2 yemas laterales; para organogénesis se utilizaron las plantas obtenidas por micropropagación, de las cuales se escindieron segmentos de microesquejes. Los explantes fueron cultivados en medio Murashige y Skoog (MS, 1962) suplementado con diferentes combinaciones hormonales. Para la micropropagación se utilizaron medios constituidos solo con las sales MS completas o reducidas a 1/5, y tres medios suplementados con hormonas vegetales, obteniéndose un promedio de 4,90 brotes por explante en el medio suplementado con 0,5mg.l-1 BA. En la multiplicación masiva, el medio de cultivo fue suplementado con 2mg.l-1 BA y se obtuvo un promedio de 5,75 plantas por explante, a los 90 días de cultivo. Para la inducción de organogénesis directa se utilizó MS suplementado con 1mg.l-1 BA + 0,5mg.l-1 ANA. Tras 105 días de cultivo se observó un promedio de 25,15 brotes por explante. El 10 por ciento de los microesquejes cultivados presentaban formación de callo y la regeneración de 5,3 brotes por fragmento de callo de 1 cm 2. La regeneración D. alata por micropropagación se obtiene después de 4,5 meses de cultivo, mientras que por organogénesis se obtiene a los 6 meses, pero con mayor número promedio de brotes por explante. En ambos sistemas, el enraizamiento se logró en el mismo medio usado para el establecimiento del proceso. Las plantas regeneradas a partir de estos sistemas se aclimataron en sustratos de tierra negra abonada y arena lavada (1:1) con eficiencia de 70.7 por ciento de plantas aclimatadas.

Micropropagación y organogenesis de aster ericoides cultivar Monte Cassino / Micropropagation and organogenesis of the Monte Cassino cultivar of aster ericoides

La micropropagación y la organogénesis de Aster ericoides cultivar Monte Cassino fueron establecidas a partir del cultivo de yemas, microesquejes y hojas obtenidos de plantas de 2 meses de edad mantenidas en condiciones de vivero. Las yemas y microesquejes fueron cultivados en medios MS suplementados con 1mgúl-¹ de cinetina (K) y 0,5mgúl-¹ de ácido indolacético (AIA), obteniendo a los 2 meses de cultivo un promedio de 4,68 brotes a partir del cultivo de microesquejes y de 2,64 brotes a partir del cultivo de yemas. El proceso de organogénesis fue inducido utilizando explantes de hojas de plantas cultivadas in vitro en medios MS suplementados con benciladenina (BA) y ácido naftaleno-acético (ANA). El proceso de organogénesis directa fue observado en medio MS suplementado con 0,5mgúl-¹ BA y 0,5mgúl-¹ ANA, obteniendo un número promedio de 1 brote por explante, a los 30-45 días de cultivo. La organogénesis indirecta se observó a partir de callos cultivados en medios suplementados con las mayores concentraciones de BA, obteniéndose el mayor índice de formación de brotes (1,16) en el medio suplementado con 5mgúl-¹ BA y 0,5mgúl-¹ ANA, a los 6 meses de cultivo. El mayor porcentaje de aclimatación (80 por ciento) fue observado en plantas obtenidas a partir del proceso de organogénesis en sustratos de tierra negra. La micropropagación a través del cultivo de microesquejes resultó el sistema de propagación in vitro más eficiente para Aster ericoides cultivar Monte Cassino.

Estudios anatomicos y morfologicos de la iniciacion de embriones somaticos obtenidos a partir de apices meristematicos de Musa sp / Anatomic and morphological studies on the initiation of somatic embryos obtained from meristematic apexes of Musa sp

El origen de embriones somáticos obtenidos de ápices meristemáticos del clon de Musa (AAA) 'Gran enano', fue analizado mediante estudios histológicos y morfológicos durante las diferentes fases de desarrollo del proceso. La investigación reveló que los embriones somáticos se originaron directamente de células del parénquima perivascular de las hojas. Secciones histológicas de los embriones globulares mostraron una disposición radial de las células y la presencia de una epidermis que rodea completamente al embrión. Con la adición de citocinina (Z o BA), algunos embriones permanecieron en estado globular, con ligeros signos de agrandamiento sin un posterior desarrollo de la invaginación. Otros lograron alcanzar el estado de embrión globular con invaginación; otros el estado alargado, con una clara diferenciación entre el extremo apical y basal y con tejidos fotosintéticamente activos, pero no se logró la regeneración de plantas completas. Tratamientos adicionales, como es el someter a los embriones a un "shock osmótico" o la adición de GA3, fueron también probados sin éxito. Al presente, no tenemos una explicación para la no regeneración de las plantas, por lo tanto sugerimos que se deben realizar experimentos adicionales, como lo son estudios histológicos y bioquímicos en estados tempranos, intermedios y tardíos de la embriogénesis somática, para tratar de entender en que momento y porque, son interrumpidos los procesos fisiológicos normales del desarrollo del embrión.